aigéad oxalach ar einsímí frithocsaídeacha agus comhábhair ghníomhacha Panax notoginseng faoi strus caidmiam

Go raibh maith agat as cuairt a thabhairt ar Nature.com. Tá tacaíocht theoranta CSS ag an leagan brabhsálaí atá in úsáid agat. Chun na torthaí is fearr a fháil, molaimid leagan níos nuaí de do bhrabhsálaí a úsáid (nó mód comhoiriúnachta a mhúchadh in Internet Explorer). Idir an dá linn, chun tacaíocht leanúnach a chinntiú, táimid ag taispeáint an tsuímh gan stíl ná JavaScript.
Is bagairt fhéideartha é éilliú caidmiam (Cd) do shábháilteacht saothrú an phlanda íocshláinte Panax notoginseng in Yunnan. Faoi strus eisgéineach Cd, rinneadh turgnaimh allamuigh chun tuiscint a fháil ar éifeachtaí chur i bhfeidhm aoil (0, 750, 2250 agus 3750 kg/u/m2) agus spraeáil duilleach le haigéad ocsaileach (0, 0.1 agus 0.2 mol/L) ar charnadh Cd agus frithocsaídeoirí. Comhpháirteanna sistéamacha agus íocshláinte Panax notoginseng. Léirigh na torthaí, faoi strus Cd, gur féidir le haol agus spraeáil duilleach le haigéad ocsaileach cion Ca2+ Panax notoginseng a mhéadú agus tocsaineacht Cd2+ a laghdú. Mhéadaigh cur leis aoil agus aigéad ocsaileach gníomhaíocht einsímí frithocsaídeacha agus d'athraigh sé meitibileacht rialtóirí osmóiseacha. Is é an ceann is suntasaí ná an méadú ar ghníomhaíocht CAT faoi 2.77 uair. Faoi thionchar aigéad ocsaileach, mhéadaigh gníomhaíocht SOD go 1.78 uair. Laghdaigh cion MDA faoi 58.38%. Tá comhghaol an-suntasach ann le siúcra intuaslagtha, aimínaigéid shaora, próilín agus próitéin intuaslagtha. Is féidir le haol agus aigéad ocsaileach cion ian cailciam (Ca2+) Panax notoginseng a mhéadú, cion Cd a laghdú, friotaíocht struis Panax notoginseng a fheabhsú, agus táirgeadh saponins agus flavonoids iomlána a mhéadú. Is é cion Cd an ceann is ísle, 68.57% níos ísle ná an rialú, agus comhfhreagraíonn sé don luach caighdeánach (Cd≤0.5 mg kg-1, GB/T 19086-2008). Ba é 7.73% cion SPN, ag baint amach an leibhéal is airde i measc na gcóireálacha uile, agus mhéadaigh cion flavonoid go suntasach faoi 21.74%, ag baint amach luachanna míochaine caighdeánacha agus toradh is fearr.
Is truailleán coitianta in ithreacha saothraithe é caidmiam (Cd), imirceann sé go héasca agus tá tocsaineacht bhitheolaíoch shuntasach aige. Thuairiscigh El-Shafei et al2 go mbíonn tionchar ag tocsaineacht caidmiam ar cháilíocht agus ar tháirgiúlacht na bplandaí a úsáidtear. Tá leibhéil iomarcacha caidmiam in ithir saothraithe in iardheisceart na Síne tar éis éirí tromchúiseach le blianta beaga anuas. Is í Cúige Yunnan ríocht bhithéagsúlachta na Síne, agus tá speicis plandaí míochaine rangaithe den chéad uair sa tír. Mar sin féin, tá Cúige Yunnan saibhir in acmhainní mianraí, agus bíonn truailliú miotail throma san ithir mar thoradh ar an bpróiseas mianadóireachta go dosheachanta, rud a théann i bhfeidhm ar tháirgeadh plandaí míochaine áitiúla.
Is planda míochaine luibheach ilbhliantúil an-luachmhar é Panax notoginseng (Burkill) Chen3) a bhaineann leis an ngéineas Panax den fhine Araliaceae. Feabhsaíonn Panax notoginseng scaipeadh fola, cuireann sé deireadh le marbhántacht fola agus faoiseann sé pian. Is é Maoracht Wenshan, Cúige Yunnan5 an príomhlimistéar táirgthe. Tá níos mó ná 75% den ithir i limistéir fhás ginseng Panax notoginseng áitiúla éillithe le caidmiam, le leibhéil ag athrú ó 81% go dtí os cionn 100% i gceantair éagsúla6. Laghdaíonn éifeacht thocsaineach Cd go suntasach freisin táirgeadh comhpháirteanna míochaine Panax notoginseng, go háirithe saponins agus flavonoids. Is cineál comhdhúile gliocóisídeach iad saponins a bhfuil a n-aglicóin triterpenoids nó spirostanes. Is iad príomh-chomhábhair ghníomhacha go leor leigheasanna traidisiúnta Síneacha agus tá saponins iontu. Tá gníomhaíocht fhrithmhiocróbach nó gníomhaíochtaí bitheolaíocha luachmhara ag roinnt saponins freisin amhail éifeachtaí frithphireatacha, suaimhneacha agus frithailse7. De ghnáth, tagraíonn flavonoidí do shraith comhdhúile ina bhfuil dhá fháinne beinséine le grúpaí feanólacha hiodrocsaile ceangailte trí thrí adamh carbóin lárnacha. Is é 2-feinilcrómanón 8 an príomhchroí. Is frithocsaídeoir láidir é ar féidir leis fréamhacha saora ocsaigine a dhíbirt go héifeachtach i bplandaí. Féadfaidh sé freisin treá einsímí bitheolaíocha athlastacha a chosc, cneasú créachta agus faoiseamh pian a chur chun cinn, agus leibhéil colaistéaróil a ísliú. Tá sé ar cheann de na príomh-chomhábhair ghníomhacha de Panax notoginseng. Tá géarghá le dul i ngleic le fadhb an éillithe caidmiam in ithreacha i limistéir táirgthe Panax ginseng agus táirgeadh a chomhábhair leighis riachtanacha a chinntiú.
Tá aol ar cheann de na pasivitheoirí a úsáidtear go forleathan le haghaidh íonú ithreach seasta ó éilliú caidmiam10. Bíonn tionchar aige ar ionsú agus ar thaisceadh Cd san ithir trí bhith-infhaighteacht Cd san ithir a laghdú tríd an luach pH a mhéadú agus acmhainn malartaithe catóin na hithreach (CEC), sáithiú salainn ithreach (BS) agus acmhainneacht ocsaídiúcháin-athdhíghrádaithe ithreach (Eh)3, 11 a athrú. Ina theannta sin, soláthraíonn aol méid mór Ca2+, foirmíonn sé antagonachas ianach le Cd2+, déanann sé iomaíocht le haghaidh suíomhanna ionsúcháin i bhfréamhacha, cuireann sé cosc ​​​​ar iompar Cd isteach san ithir, agus tá tocsaineacht bhitheolaíoch íseal aige. Nuair a cuireadh 50 mmol L-1 Ca leis faoi strus Cd, cuireadh cosc ​​​​ar iompar Cd i nduilleoga sesame agus laghdaíodh carnadh Cd 80%. Tuairiscíodh roinnt staidéar comhchosúil i rís (Oryza sativa L.) agus barra eile12,13.
Is modh nua le blianta beaga anuas é spraeáil duilleach barra chun carnadh miotal trom a rialú. Baineann a phrionsabal go príomha leis an imoibriú cealaithe i gcealla plandaí, rud a fhágann go dtaiscítear miotal trom ar bhalla na cille agus a chuireann cosc ​​ar iontógáil miotal trom ag plandaí14,15. Mar ghníomhaire cealaithe dé-aigéad cobhsaí, is féidir le haigéad ocsaileach iain miotail throma a chealú go díreach i bplandaí, rud a laghdaíonn tocsaineacht. Léirigh taighde gur féidir le haigéad ocsaileach i bpónairí soighe Cd2+ a chealú agus criostail ina bhfuil Cd a scaoileadh trí na cealla tríchóim uachtaracha, rud a laghdaíonn leibhéil Cd2+ sa chorp16. Is féidir le haigéad ocsaileach pH ithreach a rialáil, gníomhaíocht sárocsaíd dismutase (SOD), peroxidase (POD) agus catalase (CAT) a fheabhsú, agus treá siúcra intuaslagtha, próitéine intuaslagtha, aimínaigéid shaora agus próilín a rialáil. Rialtóirí meitibileach17,18. Cruthaíonn aigéad agus barraíocht Ca2+ sa phlanda deascán ocsalate cailciam faoi ghníomhaíocht próitéiní núicléataithe. Is féidir le rialáil tiúchan Ca2+ i bplandaí rialáil éifeachtach a dhéanamh ar aigéad ocsalach tuaslagtha agus Ca2+ i bplandaí agus carnadh iomarcach aigéad ocsalach agus Ca2+ a sheachaint19,20.
Tá an méid aoil a chuirtear i bhfeidhm ar cheann de na príomhfhachtóirí a mbíonn tionchar acu ar an éifeacht dheisiúcháin. Fuarthas amach go raibh an dáileog aoil idir 750 agus 6000 kg/m2. I gcás ithreach aigéadach le pH de 5.0~5.5, tá éifeacht aoil a chur i bhfeidhm ag dáileog de 3000~6000 kg/u/m2 i bhfad níos airde ná mar a bhíonn ag dáileog de 750 kg/u/m221. Mar sin féin, beidh roinnt éifeachtaí diúltacha ar an ithir mar thoradh ar ró-chur i bhfeidhm aoil, amhail athruithe suntasacha i pH na hithreach agus dlúthú ithreach22. Dá bhrí sin, shainmhíníomar na leibhéil chóireála CaO mar 0, 750, 2250 agus 3750 kg hm-2. Nuair a cuireadh aigéad ocsaileach i bhfeidhm ar Arabidopsis thaliana, fuarthas amach go raibh Ca2+ laghdaithe go suntasach ag tiúchan 10 mmol L-1, agus d’fhreagair an teaghlach géine CRT, a mbíonn tionchar aige ar chomharthaíocht Ca2+, go láidir20. A bhuí le carnadh roinnt staidéar roimhe seo, bhíomar in ann tiúchan an tástála seo a chinneadh agus staidéar breise a dhéanamh ar éifeacht idirghníomhaíocht forlíonta eisgéineacha ar Ca2+ agus Cd2+23,24,25. Dá bhrí sin, tá sé mar aidhm ag an staidéar seo meicníocht rialála spraeála duille aoil eisgéineach agus aigéid ocsaileach ar ábhar Cd agus ar fhulangacht struis Panax notoginseng in ithir atá truaillithe le Cd a iniúchadh agus bealaí a iniúchadh tuilleadh chun cáilíocht agus éifeachtúlacht leighis a chinntiú níos fearr. Táirgeadh Panax notoginseng. Soláthraíonn sé treoir luachmhar maidir le scála saothrú plandaí luibheacha in ithreacha atá truaillithe le caidmiam a mhéadú agus an táirgeadh inbhuanaithe ardchaighdeáin a theastaíonn ón margadh cógaisíochta a bhaint amach.
Agus an cineál ginseng áitiúil Wenshan Panax notoginseng á úsáid mar ábhar, rinneadh turgnamh allamuigh i Lannizhai, Contae Qiubei, Maoracht Wenshan, Cúige Yunnan (24°11′N, 104°3′O, airde 1446 m). Is é 17°C an meánteocht bhliantúil agus is é 1250 mm an meándeascadh bliantúil. Ba iad luachanna cúlra na hithreach a ndearnadh staidéar uirthi ná TN 0.57 g kg-1, TP 1.64 g kg-1, TC 16.31 g kg-1, OM 31.86 g kg-1, N hidrealaithe alcaile 88.82 mg kg-1, saor ó fhosfar 18.55 mg kg-1, potaisiam saor 100.37 mg kg-1, caidmiam iomlán 0.3 mg kg-1, pH 5.4.
Ar an 10 Nollaig 2017, meascadh 6 mg/kg Cd2+ (CdCl2·2.5H2O) agus cóireáil aoil (0, 750, 2250 agus 3750 kg/u/m2) agus cuireadh i bhfeidhm iad ar dhromchla na hithreach i sraith 0~10 cm ar gach plota. Rinneadh gach cóireáil a athdhéanamh 3 huaire. Lonntaíodh plotaí tástála go randamach, agus clúdaíonn gach plota achar 3 m2. Trasphlandáladh síológa Panax notoginseng bliain d'aois tar éis 15 lá de churadóireacht. Agus líontán scáth gréine á úsáid, bíonn déine solais Panax notoginseng taobh istigh den líontán scáth gréine thart ar 18% de dhéine solais nádúrtha gnáth. Déantar an saothrú de réir modhanna saothraithe traidisiúnta áitiúla. Roimh chéim aibithe Panax notoginseng in 2019, spraeáladh aigéad oxalach i bhfoirm oxaláit sóidiam. Bhí tiúchan aigéad ocsaileach 0, 0.1 agus 0.2 mol L-1, faoi seach, agus úsáideadh NaOH chun an pH a choigeartú go 5.16 chun meán-pH an tuaslagáin sceite bruscair a insamhladh. Spraeáil dromchlaí uachtaracha agus íochtaracha na nduilleog uair sa tseachtain ag 8:00 am. Tar éis spraeáil 4 huaire sa 5ú seachtain, bailíodh plandaí Panax notoginseng 3 bliana d'aois.
I mí na Samhna 2019, bailíodh plandaí Panax notoginseng trí bliana d'aois ón bpáirc agus spraeáladh iad le haigéad ocsaileach. Cuireadh roinnt samplaí de phlandaí Panax notoginseng trí bliana d'aois, a raibh gá a meitibileacht fhiseolaíoch agus gníomhaíocht einsímí a thomhas, i bhfeadáin le reo. Reoite go tapa iad le nítrigin leachtach agus ansin aistríodh iad chuig cuisneoir ag -80°C. Rinneadh roinnt samplaí fréimhe a bhí le tomhas le haghaidh Cd agus cion comhábhar gníomhach ag céim aibíochta a ní le huisce sconna, a thriomú ag 105°C ar feadh 30 nóiméad, ag meáchan tairiseach ag 75°C, agus a mheilt i moirtéal le haghaidh stórála.
Meáigh 0.2 g de shampla plandaí tirime, cuir i bhfleascán Erlenmeyer é, cuir 8 ml HNO3 agus 2 ml HClO4 leis agus clúdaigh thar oíche. An lá dár gcionn, bain úsáid as tonnadóir cuartha atá curtha i bhfleascán Erlenmeyer le haghaidh díleá leictritheirmeach go dtí go mbeidh deatach bán le feiceáil agus go mbeidh na súnna díleácha soiléir. Tar éis fuaraithe go teocht an tseomra, aistríodh an meascán go fleascán toirtmhéadrach 10 ml. Cinneadh cion Cd ag baint úsáide as speictriméadar ionsúcháin adamhach (Thermo ICE™ 3300 AAS, SAM). (GB/T 23739-2009).
Meáigh 0.2 g de shampla plandaí tirime, cuir i mbotella plaisteach 50 ml é, cuir 1 móil L-1 HCL i 10 ml, cuir an caipín air agus croith go maith é ar feadh 15 uair an chloig agus scag. Ag baint úsáide as pipéad, pípéadaigh an méid scagáite riachtanach, caolaigh é dá réir agus cuir tuaslagán SrCl2 leis chun tiúchan Sr2+ a thabhairt go 1g L-1. Tomhaiseadh cion Ca ag baint úsáide as speictriméadar ionsúcháin adamhach (Thermo ICE™ 3300 AAS, SAM).
Modh trealaimh tagartha malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POD) agus catalase (CAT) (DNM-9602, Beijing Prong New Technology Co., Ltd., clárú táirge), bain úsáid as an trealamh tomhais comhfhreagrach. Uimh.: Beijing Pharmacopoeia (cruinn) 2013 Uimh. 2400147).
Meáigh thart ar 0.05 g de shampla Panax notoginseng agus cuir imoibrí antrón-aigéad sulfarach feadh thaobhanna an fheadáin. Croith an feadán ar feadh 2-3 soicind chun an leacht a mheascadh go maith. Cuir an feadán ar raca feadáin chun dath a fhorbairt ar feadh 15 nóiméad. Cinneadh cion siúcra intuaslagtha trí speictreafótaiméadracht ultraivialait-infheicthe (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., an tSín) ag tonnfhad 620 nm.
Meáigh 0.5 g de shampla úr de Panax notoginseng, meilt é ina homogenate le 5 ml d'uisce driogtha, agus ansin lártheifneoirigh ag 10,000 g ar feadh 10 nóiméad. Caolaíodh an forshnáithín go toirt sheasta. Baineadh úsáid as an modh Coomassie Brilliant Blue. Tomhaiseadh cion próitéine intuaslagtha ag baint úsáide as speictreafótaiméadracht ultraivialait-infheicthe (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., an tSín) ag tonnfhad 595 nm agus ríomhadh é bunaithe ar an gcuar caighdeánach d'albaimin séirim bólachta.
Meáigh 0.5 g de shampla úr, cuir 5 ml d'aigéad aicéiteach 10% leis, meilt go dtí go mbeidh homaigináit ann, scag agus caolaigh go dtí go mbeidh toirt tairiseach ann. Baineadh úsáid as an modh forbartha datha le tuaslagán ninhidrín. Cinneadh cion aimínaigéid shaora trí speictreafótaiméadracht UV-infheicthe (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., an tSín) ag 570 nm agus ríomhadh é bunaithe ar an gcuar caighdeánach leucine28.
Meáigh 0.5 g de shampla úr, cuir 5 ml de thuaslagán 3% d'aigéad sulfosailicileach leis, teas i ndabhach uisce agus croith ar feadh 10 nóiméad. Tar éis fuaraithe, scagadh an tuaslagán agus tugadh go toirt tairiseach é. Baineadh úsáid as an modh dathmhéadrach le haigéad ninhidrin. Cinneadh cion próilín trí speictreafótaiméadracht ultraivialait-infheicthe (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., an tSín) ag tonnfhad 520 nm agus ríomhadh é bunaithe ar an gcuar caighdeánach próilín29.
Cinneadh cion saponin trí chrómatagrafaíocht leachtach ardfheidhmíochta agus tagairt á déanamh do Pharmacopoeia Phoblacht Phoblacht na Síne (eagrán 2015). Is é bunphrionsabal na crómatagrafaíochta leachtach ardfheidhmíochta leacht ardbhrú a úsáid mar an chéim shoghluaiste agus teicneolaíocht scaradh cáithníní ultrafine de chrómatagrafaíocht cholún ardfheidhmíochta a chur i bhfeidhm ar an gcéim sheasta. Seo a leanas an teicníc oibriúcháin:
Coinníollacha HPLC agus Tástáil Oiriúnachta Córais (Tábla 1): Bain úsáid as glóthach shilice ceangailte le hochtadeicilsilán mar an líontóir, aicéatóinítríl mar an chéim shoghluaiste A agus uisce mar an chéim shoghluaiste B. Déan elution grádáin mar a thaispeántar sa tábla thíos. Is é 203 nm an tonnfhad braite. De réir bhuaic R1 na saponiní iomlána de Panax notoginseng, ba cheart go mbeadh líon na plátaí teoiriciúla 4000 ar a laghad.
Ullmhú tuaslagáin chaighdeánaigh: Meáigh ginsenoside Rg1, ginsenoside Rb1 agus notoginsenoside R1 go cruinn agus cuir meatánól leis chun meascán a ullmhú ina bhfuil 0.4 mg ginsenoside Rg1, 0.4 mg ginsenoside Rb1 agus 0.1 mg notoginsenoside R1 in aghaidh gach 1 ml den tuaslagán.
Ullmhú an tuaslagáin tástála: Meáigh 0.6 g de phúdar ginseng Panax agus cuir 50 ml de meatánól leis. Meáigh an tuaslagán measctha (W1) agus fágadh thar oíche é. Ansin, fiuchadh an tuaslagán measctha go réidh i ndabhach uisce ag 80°C ar feadh 2 uair an chloig. Tar éis fuaraithe, meáigh an tuaslagán measctha agus cuir an meatánól ullmhaithe leis an gcéad mhais W1. Ansin croith go maith agus scag. Fágtar an scagáit le haghaidh anailíse.
Bailigh 10 μL den tuaslagán caighdeánach agus 10 μL den scagáit go cruinn agus instealladh iad i gcrómatagraf leachtach ardfheidhmíochta (Thermo HPLC-ultimate 3000, Seymour Fisher Technology Co., Ltd.) chun cion an tsaponin 24 a chinneadh.
Cuar caighdeánach: tomhas ar thuaslagán caighdeánach measctha de Rg1, Rb1 agus R1. Tá na coinníollacha crómatagrafaíochta mar an gcéanna leis na coinníollacha thuas. Ríomh an cuar caighdeánach tríd an achar buaice tomhaiste a phlota ar an ais-y agus tiúchan an tsaponin sa tuaslagán caighdeánach ar an ais-x. Is féidir tiúchan an tsaponin a ríomh trí achar buaice tomhaiste an tsampla a chur in ionad an chuar chaighdeánaigh.
Meáigh 0.1 g de shampla P. notogensings agus cuir 50 ml de thuaslagán 70% CH3OH leis. Rinneadh eastóscadh ultrasonaic ar feadh 2 uair an chloig, agus ina dhiaidh sin rinneadh lártheifneoiriú ag 4000 rpm ar feadh 10 nóiméad. Glac 1 ml den fhorshnáithín agus caolaigh é 12 uair. Cinneadh an cion flavonoid ag baint úsáide as speictreafótaiméadracht ultraivialait-infheicthe (UV-5800, Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., an tSín) ag tonnfhad 249 nm. Tá quercetin ar cheann de na substaintí caighdeánacha coitianta8.
Eagraíodh na sonraí ag baint úsáide as bogearraí Excel 2010. Baineadh úsáid as bogearraí staitistiúla SPSS 20 chun anailís athraitheas a dhéanamh ar na sonraí. Tarraingíodh pictiúir ag baint úsáide as Origin Pro 9.1. Áirítear leis na luachanna staitistiúla ríofa meán ± SD. Tá ráitis suntasachta staitistiúla bunaithe ar P < 0.05.
Ag an tiúchan céanna d’aigéad ocsaileach a spraeáladh ar na duilleoga, mhéadaigh cion Ca i bhfréamhacha Panax notoginseng go suntasach de réir mar a mhéadaigh an méid aoil a cuireadh i bhfeidhm (Tábla 2). I gcomparáid leis an easpa aoil, mhéadaigh cion Ca 212% nuair a cuireadh 3750 kg/u/m2 d’aoil leis gan aigéad ocsaileach a spraeáil. Don mhéid céanna aoil a cuireadh i bhfeidhm, mhéadaigh cion Ca beagán de réir mar a mhéadaigh tiúchan an aigéid ocsaileach a spraeáladh.
Tá cion Cd sna fréamhacha idir 0.22 agus 0.70 mg kg-1. Ag an tiúchan céanna spraeála d'aigéad ocsaileach, de réir mar a mhéadaíonn an méid aoil a chuirtear leis, laghdaíonn cion Cd de 2250 kg/u go suntasach. I gcomparáid leis an rialú, laghdaigh cion Cd sna fréamhacha 68.57% tar éis spraeáil le 2250 kg hm-2 aoil agus 0.1 mol l-1 aigéad ocsaileach. Nuair a cuireadh gan aol agus 750 kg/u aoil i bhfeidhm, laghdaigh cion Cd i bhfréamhacha Panax notoginseng go suntasach de réir mar a mhéadaigh tiúchan spraeála aigéad ocsaileach. Nuair a cuireadh 2250 kg/m2 aoil agus 3750 kg/m2 aoil i bhfeidhm, laghdaigh cion Cd na fréimhe ar dtús agus ansin mhéadaigh sé de réir mar a mhéadaigh tiúchan aigéad ocsaileach. Ina theannta sin, léirigh anailís dhéathrógach go raibh tionchar suntasach ag aol ar ábhar Ca fhréamhacha Panax notoginseng (F = 82.84**), go raibh tionchar suntasach ag aol ar ábhar Cd i bhfréamhacha Panax notoginseng (F = 74.99**), agus aigéad ocsaileach (F=7.72*).
De réir mar a mhéadaigh an méid aoil a cuireadh leis agus tiúchan an aigéid ocsailigh spraeáilte, laghdaigh cion MDA go suntasach. Ní raibh aon difríocht shuntasach idir cion MDA i bhfréamhacha Panax notoginseng gan aoil a chur leis agus le 3750 kg/m2 d'aoil a chur leis. Ag rátaí cur i bhfeidhm de 750 kg/u/m2 agus 2250 kg/u/m2, laghdaigh cion aoil na cóireála spraeála aigéid ocsailigh 0.2 mol/L faoi 58.38% agus 40.21%, faoi seach, i gcomparáid le gan aon chóireáil spraeála aigéid ocsailigh. Breathnaíodh an cion MDA is ísle (7.57 nmol g-1) agus 750 kg hm-2 d'aoil agus 0.2 mol l-1 d'aigéad ocsaileach á spraeáil (Fíor 1).
Éifeacht spraeála duilleach le haigéad ocsaileach ar ábhar malondialdehyde i bhfréamhacha Panax notoginseng faoi strus caidmiam. Nóta: Léiríonn an finscéal sa fhigiúr tiúchan an aigéid ocsaileach ag an spraeáil (mol L-1), léiríonn litreacha beaga difriúla difríochtaí suntasacha idir cóireálacha den chur i bhfeidhm aoil chéanna. uimhir (P < 0.05). Mar an gcéanna thíos.
Ach amháin i gcás cur 3750 kg/u aoil i bhfeidhm, ní raibh aon difríocht shuntasach i ngníomhaíocht SOD i bhfréamhacha Panax notoginseng. Agus 0, 750 agus 2250 kg/u/m2 d'aol curtha leis, bhí gníomhaíocht SOD nuair a rinneadh cóireáil air trí spraeáil le haigéad ocsaileach ag tiúchan 0.2 mol/l i bhfad níos airde ná mar a bhí gan úsáid aigéad ocsaileach, ag méadú 177.89%, 61.62% agus 45.08% faoi seach. Ba é gníomhaíocht SOD sna fréamhacha (598.18 U g-1) an ceann is airde in éagmais cur aoil agus nuair a rinneadh cóireáil air trí spraeáil le haigéad ocsaileach ag tiúchan 0.2 mol/l. Nuair a spraeáladh aigéad ocsaileach ag an tiúchan céanna nó 0.1 mol L-1, mhéadaigh gníomhaíocht SOD de réir mar a mhéadaigh an méid aoil a cuireadh leis. Tar éis spraeáil le 0.2 mol/L d'aigéad ocsaileach, laghdaigh gníomhaíocht SOD go suntasach (Fíor 2).
Éifeacht spraeála duilleoga le haigéad ocsaileach ar ghníomhaíocht sárocsaíd dismutase, peroxidase agus catalase i bhfréamhacha Panax notoginseng faoi strus caidmiam
Cosúil le gníomhaíocht SOD i bhfréamhacha, ba í gníomhaíocht POD i bhfréamhacha a ndearnadh cóireáil orthu gan aol agus a spraeáladh le 0.2 mol L-1 d'aigéad ocsaileach an ceann is airde (63.33 µmol g-1), atá 148.35% níos airde ná an rialú (25.50 µmol g-1). De réir mar a mhéadaigh tiúchan spraeála aigéad ocsaileach agus cóireáil aoil 3750 kg/m2, mhéadaigh gníomhaíocht POD ar dtús agus ansin laghdaigh sí. I gcomparáid leis an gcóireáil le 0.1 mol L-1 d'aigéad ocsaileach, laghdaigh gníomhaíocht POD 36.31% nuair a rinneadh cóireáil air le 0.2 mol L-1 d'aigéad ocsaileach (Fíor 2).
Ach amháin nuair a spraeáladh 0.2 mol/l d'aigéad ocsaileach agus nuair a cuireadh 2250 kg/u/m2 nó 3750 kg/u/m2 d'aol leis, bhí gníomhaíocht CAT i bhfad níos airde ná an rialú. Agus 0.1 mol/l d'aigéad ocsaileach á spraeáil agus 0.2250 kg/m2 nó 3750 kg/u/m2 d'aol á chur leis, mhéadaigh gníomhaíocht CAT faoi 276.08%, 276.69% agus 33.05%, faoi seach, i gcomparáid le cóireáil gan aigéad ocsaileach a spraeáil. Ba é gníomhaíocht CAT sna fréamhacha an ceann is airde (803.52 μmol/g) sa chóireáil gan aol agus sa chóireáil aigéad ocsaileach 0.2 mol/L. Ba é gníomhaíocht CAT an ceann is ísle (172.88 μmol/g) nuair a rinneadh cóireáil air le 3750 kg/u/m2 d'aol agus 0.2 mol/L d'aigéad ocsaileach (Fíor 2).
Léirigh anailís dhéathrógach go raibh baint shuntasach ag gníomhaíocht CAT agus gníomhaíocht MDA fhréamhacha Panax notoginseng leis an méid aigéid ocsailigh nó aoil a spraeáladh agus an dá chóireáil (Tábla 3). Bhí baint shuntasach ag gníomhaíocht SOD sna fréamhacha le cóireáil aoil agus aigéid ocsailigh nó tiúchan spraeála aigéid ocsailigh. Bhí gníomhaíocht POD fréimhe ag brath go suntasach ar an méid aoil a cuireadh i bhfeidhm nó ar an gcóireáil aoil agus aigéid ocsailigh.
Laghdaigh cion na siúcraí intuaslagtha sna fréamhacha de réir mar a mhéadaigh an méid aoil a cuireadh i bhfeidhm agus tiúchan an spraeála aigéid ocsailaigh. Ní raibh aon difríocht shuntasach idir cion na siúcraí intuaslagtha i bhfréamhacha Panax notoginseng gan aoil a chur i bhfeidhm agus nuair a cuireadh 750 kg/u/m² d'aoil i bhfeidhm. Nuair a cuireadh 2250 kg/m2 d'aoil i bhfeidhm, bhí cion an tsiúcra intuaslagtha nuair a rinneadh cóireáil air le 0.2 mol/L d'aigéad ocsaileach i bhfad níos airde ná mar a bhí nuair a rinneadh cóireáil air gan aigéad ocsaileach a spraeáil, ag méadú 22.81%. Nuair a cuireadh 3750 kg u/m² d'aoil i bhfeidhm, laghdaigh cion an tsiúcra intuaslagtha go suntasach de réir mar a mhéadaigh tiúchan an aigéid ocsailaigh spraeáilte. Laghdaigh cion an tsiúcra intuaslagtha nuair a rinneadh cóireáil air le 0.2 mol L-1 d'aigéad ocsaileach 38.77% i gcomparáid leis an méid gan aigéad ocsaileach a spraeáil. Ina theannta sin, ba é 205.80 mg·g-1 an chóireáil spraeála aigéid ocsailaigh 0.2 mol·L-1 a raibh an cion siúcra intuaslagtha is ísle aige (Fíor 3).
Éifeacht spraeála duilleach le haigéad ocsaileach ar ábhar siúcra iomláin intuaslagtha agus próitéine intuaslagtha i bhfréamhacha Panax notoginseng faoi strus caidmiam
Laghdaigh cion próitéine intuaslagtha sna fréamhacha de réir mar a mhéadaigh an cur i bhfeidhm aoil agus an spraeála aigéid ocsailaigh. Gan aol a chur leis, laghdaíodh cion na próitéine intuaslagtha go suntasach faoi 16.20% i gcomparáid leis an rialú nuair a rinneadh cóireáil air le spraeáil aigéid ocsailaigh ag tiúchan 0.2 mol L-1. Ní raibh aon difríochtaí suntasacha i gcion próitéine intuaslagtha fréamhacha Panax notoginseng nuair a cuireadh 750 kg/u d'aol i bhfeidhm. Faoi na coinníollacha cur i bhfeidhm de 2250 kg/u/m² d'aol, bhí cion próitéine intuaslagtha na cóireála spraeála aigéid ocsailaigh 0.2 mol/L i bhfad níos airde ná cion na cóireála spraeála neamh-ocsailaigh (35.11%). Nuair a cuireadh 3750 kg·u/m2 d'aol i bhfeidhm, laghdaigh cion na próitéine intuaslagtha go suntasach de réir mar a mhéadaigh tiúchan na spraeála aigéid ocsailaigh, leis an gcion próitéine intuaslagtha is ísle (269.84 μg·g-1) nuair a bhí an spraeáil aigéid ocsailaigh 0.2 mol·L-1 (Fíor 3).
Ní raibh aon difríochtaí suntasacha i gcion na n-aimínaigéad saor in fhréamh Panax notoginseng in éagmais cur aoil. De réir mar a mhéadaigh tiúchan aigéid ocsailaigh spraeála agus nuair a cuireadh 750 kg/u/m2 d'aol leis, laghdaigh cion na n-aimínaigéad saor in aisce ar dtús agus ansin mhéadaigh sé. I gcomparáid leis an gcóireáil gan aigéad ocsaileach a spraeáil, mhéadaigh cion na n-aimínaigéad saor in aisce go suntasach faoi 33.58% nuair a spraeáladh 2250 kg hm-2 d'aol agus 0.2 mol l-1 d'aigéad ocsaileach. Laghdaigh cion na n-aimínaigéad saor in aisce go suntasach de réir mar a mhéadaigh tiúchan aigéid ocsailaigh spraeála agus nuair a cuireadh 3750 kg/m2 d'aol leis. Laghdaíodh cion aimínaigéid shaor in aghaidh na cóireála spraeála aigéid ocsailaigh 0.2 mol L-1 faoi 49.76% i gcomparáid le cóireáil spraeála neamh-ocsaileach. Ba é an cion aimínaigéid shaor is airde gan spraeáil aigéid ocsailaigh agus ba é 2.09 mg g-1 é. Ba é an chóireáil spraeála aigéid ocsaileach 0.2 mol/L a raibh an cion aimínaigéid shaor ab ísle (1.05 mg/g) aige (Fíor 4).
Éifeacht spraeála duilleoga le haigéad ocsaileach ar ábhar aimínaigéid shaora agus próilín i bhfréamhacha Panax notoginseng faoi choinníollacha struis caidmiam
Laghdaigh cion próilín sna fréamhacha de réir mar a mhéadaigh an méid aoil a cuireadh i bhfeidhm agus an méid spraeála le haigéad ocsaileach. Ní raibh aon difríochtaí suntasacha i gcion próilín fhréamh ginseng Panax nuair nach cuireadh aoil i bhfeidhm. De réir mar a mhéadaigh tiúchan spraeála aigéad ocsaileach agus méadú ar chur i bhfeidhm 750 nó 2250 kg/m2 d'aoil, laghdaigh cion próilín ar dtús agus ansin mhéadaigh sé. Bhí cion próilín na cóireála spraeála aigéad ocsaileach 0.2 mol L-1 i bhfad níos airde ná cion na cóireála spraeála aigéad ocsaileach 0.1 mol L-1, ag méadú 19.52% agus 44.33%, faoi seach. Nuair a cuireadh 3750 kg/m2 d'aoil leis, laghdaigh cion próilín go suntasach de réir mar a mhéadaigh tiúchan an aigéid ocsaileach spraeáilte. Tar éis 0.2 mol L-1 d'aigéad ocsaileach a spraeáil, laghdaigh cion próilín 54.68% i gcomparáid leis an gcion gan aigéad ocsaileach a spraeáil. Ba é 11.37 μg/g a bhí sa chion próilín is ísle nuair a rinneadh cóireáil air le haigéad oxalach 0.2 mol/l (Fíor 4).
Is é Rg1>Rb1>R1 an t-ábhar saponin iomlán i Panax notoginseng. Ní raibh aon difríocht shuntasach idir ábhar na dtrí saponin agus tiúchan méadaitheach spraeála aigéid ocsaileach agus tiúchan gan aol a chur i bhfeidhm (Tábla 4).
Bhí an cion R1 tar éis 0.2 mol L-1 d'aigéad ocsaileach a spraeáil i bhfad níos ísle ná mar a bhí sé gan aigéad ocsaileach a spraeáil agus dáileog aoil de 750 nó 3750 kg/m2 a chur i bhfeidhm. Ag tiúchan aigéad ocsaileach spraeáilte de 0 nó 0.1 mol/L, ní raibh aon difríocht shuntasach i gcion R1 de réir mar a mhéadaigh an méid aoil a cuireadh leis. Ag tiúchan spraeála de 0.2 mol/L d'aigéad ocsaileach, bhí an cion R1 i 3750 kg/u/m2 d'aoil i bhfad níos ísle ná 43.84% gan aoil a chur leis (Tábla 4).
De réir mar a mhéadaigh tiúchan aigéid ocsailaigh an spraeála agus gur cuireadh 750 kg/m2 d'aol leis, mhéadaigh cion Rg1 ar dtús agus ansin laghdaigh sé. Ag rátaí cur i bhfeidhm aoil de 2250 agus 3750 kg/u, laghdaigh cion Rg1 de réir mar a mhéadaigh tiúchan spraeála aigéid ocsailaigh. Ag an tiúchan céanna d'aigéad ocsaileach spraeáilte, de réir mar a mhéadaíonn méid an aoil, méadaíonn cion Rg1 ar dtús agus ansin laghdaíonn sé. I gcomparáid leis an rialú, seachas cion Rg1 i dtrí thiúchan d'aigéad ocsaileach agus cóireálacha aoil 750 kg/m2, a bhí níos airde ná an rialú, bhí cion Rg1 i bhfréamhacha Panax notoginseng i gcóireálacha eile níos ísle ná an rialú. Ba é an t-uasmhéid cion Rg1 nuair a spraeáladh 750 kg/u/m2 d'aol agus 0.1 mol/l d'aigéad ocsaileach, a bhí 11.54% níos airde ná an rialú (Tábla 4).
De réir mar a mhéadaigh tiúchan aigéid ocsailaigh sa spraeáil agus an méid aoil a cuireadh i bhfeidhm ag ráta sreafa 2250 kg/u, mhéadaigh cion Rb1 ar dtús agus ansin laghdaigh sé. Tar éis 0.1 móil L-1 d'aigéad ocsaileach a spraeáil, shroich cion Rb1 uasluach 3.46%, a bhí 74.75% níos airde ná gan aigéad ocsaileach a spraeáil. I gcás cóireálacha aoil eile, ní raibh aon difríochtaí suntasacha idir tiúchain éagsúla spraeála aigéid ocsailaigh. Tar éis spraeáil le 0.1 agus 0.2 móil L-1 d'aigéad ocsaileach, de réir mar a mhéadaigh an méid aoil, laghdaigh cion Rb1 ar dtús agus ansin laghdaigh sé (Tábla 4).
Ag an tiúchan spraeála céanna le haigéad ocsaileach, de réir mar a mhéadaigh an méid aoil a cuireadh leis, mhéadaigh cion na bhflavanóideach ar dtús agus ansin laghdaigh sé. Níor braitheadh ​​aon difríocht shuntasach i gcion na bhflavanóideach agus tiúchain éagsúla d’aigéad ocsaileach gan aol agus 3750 kg/m2 d’aol á spraeáil. Agus 750 agus 2250 kg/m2 d’aol á gcur leis, de réir mar a mhéadaigh tiúchan an aigéid ocsaileach spraeáilte, mhéadaigh cion na bhflavanóideach ar dtús agus ansin laghdaigh sé. Agus 750 kg/m2 á chur i bhfeidhm agus aigéad ocsaileach á spraeáil ag tiúchan 0.1 mol/l, ba é uasmhéid cion na bhflavanóideach – 4.38 mg/g, atá 18.38% níos airde ná nuair a cuireadh an méid céanna aoil leis, agus ní raibh aon ghá le haigéad ocsaileach a spraeáil. Mhéadaigh cion na bhflavanóideach nuair a rinneadh cóireáil air le spraeáil aigéad ocsaileach 0.1 mol L-1 faoi 21.74% i gcomparáid leis an gcóireáil gan aigéad ocsaileach agus an chóireáil le haol ag dáileog de 2250 kg/m2 (Fíor 5).
Éifeacht spraeála duilleoga le hocsaileáit ar ábhar flavonoidí i bhfréamh Panax notoginseng faoi strus caidmiam
Léirigh anailís dhéathrógach go raibh cion siúcra intuaslagtha fhréamhacha Panax notoginseng ag brath go suntasach ar an méid aoil a cuireadh i bhfeidhm agus ar thiúchan an aigéid ocsailaigh a spraeáladh. Bhí cion na próitéine intuaslagtha sna fréamhacha comhghaolmhar go suntasach leis an dáileog aoil agus aigéid ocsailaigh. Bhí cion na n-aimínaigéad saor in aisce agus próilín sna fréamhacha comhghaolmhar go suntasach leis an méid aoil a cuireadh i bhfeidhm, tiúchan an aigéid ocsailaigh a spraeáladh, aoil agus aigéid ocsailaigh (Tábla 5).
Bhí cion R1 i bhfréamhacha Panax notoginseng ag brath go mór ar thiúchan an aigéid ocsailigh spraeáilte, an méid aoil, aoil agus aigéid ocsailigh a cuireadh i bhfeidhm. Bhí cion na bhflavonoidí ag brath go mór ar thiúchan an aigéid ocsailigh spraeáilte agus an méid aoiligh a cuireadh leis.
Baineadh úsáid as go leor leasuithe chun leibhéil caidmiam i bplandaí a laghdú trí chaidmiam a shocrú san ithir, amhail aol agus aigéad ocsaileach30. Úsáidtear aol go forleathan mar leasú ithreach chun leibhéil caidmiam i mbarr31 a laghdú. Thuairiscigh Liang et al.32 gur féidir aigéad ocsaileach a úsáid freisin chun ithir atá truaillithe le miotail throma a leigheas. Tar éis tiúchain éagsúla d'aigéad ocsaileach a chur le hithir éillithe, mhéadaigh cion ábhair orgánaigh na hithreach, laghdaigh an cumas malartaithe catóin, agus mhéadaigh an pH33. Is féidir le haigéad ocsaileach imoibriú le hiain miotail san ithir freisin. Faoi choinníollacha struis Cd, mhéadaigh cion Cd i Panax notoginseng go suntasach i gcomparáid leis an rialú. Mar sin féin, má úsáidtear aol, laghdaítear go suntasach é. Nuair a cuireadh 750 kg/h/m² d'aol i bhfeidhm sa staidéar seo, shroich cion Cd na bhfréamhacha an caighdeán náisiúnta (is é an teorainn Cd ná Cd≤0.5 mg/kg, AQSIQ, GB/T 19086-200834), agus bhí an éifeacht mhaith. Baintear an éifeacht is fearr amach trí 2250 kg/m2 d'aol a chur leis. Cruthaíonn cur leis an aol líon mór suíomhanna iomaíochta do Ca2+ agus Cd2+ san ithir, agus laghdaíonn cur leis an aigéad ocsalach an cion Cd i bhfréamhacha Panax notoginseng. Tar éis aol agus aigéad ocsalach a mheascadh, laghdaigh cion Cd fhréamh Panax ginseng go suntasach agus shroich sé an caighdeán náisiúnta. Déantar Ca2+ san ithir a ionsú chuig dromchla na fréimhe trí phróiseas sreafa maise agus is féidir é a ionsú i gcealla fréimhe trí chainéil chailciam (cainéil Ca2+), caidéil chailciam (Ca2+-AT-Pase) agus frithiompróirí Ca2+/H+, agus ansin a iompar go cothrománach chuig na fréamhacha. Xiléim23. Bhí comhghaol diúltach suntasach idir cion Ca agus Cd sna fréamhacha (P < 0.05). Laghdaigh an cion Cd de réir mar a mhéadaigh cion Ca, rud atá comhsheasmhach leis an smaoineamh antagonachais idir Ca agus Cd. Léirigh ANOVA go raibh tionchar suntasach ag méid an aoil ar an cion Ca i bhfréamh Panax notoginseng. Thuairiscigh Pongrack et al. 35 go ​​gceanglaíonn Cd le hocsalate i gcriostail ocsalate cailciam agus go ndéanann sé iomaíocht le Ca. Mar sin féin, ní raibh mórán suntais ag baint le héifeacht rialála aigéad ocsalic ar Ca. Léiríonn sé seo nach deascadh simplí é deascadh ocsalate cailciam ó aigéad ocsalic agus Ca2+, agus gur féidir go bhfuil roinnt conairí meitibileach ag rialú an phróisis chomhdheascadh.
Faoi strus caidmiam, cruthaítear méid mór speiceas ocsaigine imoibríoch (ROS) i bplandaí, rud a dhéanann damáiste do struchtúr na seicní cille36. Is féidir ábhar Malondialdehyde (MDA) a úsáid mar tháscaire chun leibhéal ROS agus méid an damáiste do membrane plasma plandaí37 a mheas. Is meicníocht chosanta thábhachtach é an córas frithocsaídeach chun speicis ocsaigine imoibríocha a scabadh38. De ghnáth, athraíonn strus caidmiam gníomhaíochtaí einsímí frithocsaídeacha (lena n-áirítear POD, SOD, agus CAT). Léirigh na torthaí go raibh baint dhearfach ag ábhar MDA le tiúchan Cd, rud a léiríonn gur dhoimhnigh méid peirocsaídiú lipid membrane plandaí de réir mar a mhéadaigh tiúchan Cd37. Tá sé seo ag teacht le torthaí an staidéir le Ouyang et al.39. Léiríonn an staidéar seo go bhfuil tionchar suntasach ag aol, aigéad ocsaileach, aol agus aigéad ocsaileach ar ábhar MDA. Tar éis néalú 0.1 mol L-1 d'aigéad ocsaileach, laghdaigh cion MDA Panax notoginseng, rud a léiríonn gur féidir le haigéad ocsaileach bith-infhaighteacht leibhéil Cd agus ROS i Panax notoginseng a laghdú. Is sa chóras einsímí frithocsaídeacha a tharlaíonn feidhm díthocsainithe an phlanda. Baintear O2- atá i gcealla plandaí le SOD agus táirgeann sé O2 neamh-tocsaineach agus H2O2 íseal-tocsaineach. Baintear H2O2 le POD agus CAT as fíocháin plandaí agus catalaíonn siad dianscaoileadh H2O2 ina H2O. Bunaithe ar anailís próitéóim iTRAQ, fuarthas amach gur laghdaigh leibhéil léirithe próitéine SOD agus PAL agus gur mhéadaigh leibhéal léirithe POD tar éis cur aoil faoi strus Cd40. Bhí tionchar suntasach ag an dáileog d'aigéad ocsaileach agus aol ar ghníomhaíochtaí CAT, SOD agus POD i bhfréamh Panax notoginseng. Mhéadaigh cóireáil spraeála le 0.1 mol L-1 d'aigéad ocsaileach gníomhaíocht SOD agus CAT go suntasach, ach ní raibh an éifeacht rialála ar ghníomhaíocht POD soiléir. Léiríonn sé seo go luasghéaraíonn aigéad ocsaileach dianscaoileadh ROS faoi strus Cd agus go gcríochnaíonn sé baint H2O2 den chuid is mó trí ghníomhaíocht CAT a rialáil, rud atá cosúil le torthaí taighde Guo et al.41 ar einsímí frithocsaídeacha Pseudospermum sibiricum. Kos. ). Tá éifeacht 750 kg/u/m2 aoil a chur leis ar ghníomhaíocht einsímí an chórais frithocsaídeach agus ar ábhar malondialdehyde cosúil le héifeacht spraeála le haigéad ocsaileach. Léirigh na torthaí gur féidir le cóireáil spraeála aigéad ocsaileach feabhas níos éifeachtaí a chur ar ghníomhaíochtaí SOD agus CAT i Panax notoginseng agus friotaíocht struis Panax notoginseng a fheabhsú. Laghdaíodh gníomhaíochtaí SOD agus POD trí chóireáil le 0.2 mol L-1 aigéad ocsaileach agus 3750 kg hm-2 aoil, rud a léiríonn gur féidir le spraeáil iomarcach tiúchan ard d'aigéad ocsaileach agus Ca2+ strus plandaí a chur faoi deara, rud atá comhsheasmhach le staidéar Luo agus araile. Wait 42.

 


Am an phoist: 25 Eanáir 2024