Tá Javascript díchumasaithe i do bhrabhsálaí faoi láthair. Ní oibreoidh roinnt gnéithe den suíomh Gréasáin seo nuair a bhíonn Javascript díchumasaithe.
Cláraigh le do shonraí sonracha agus an druga sonrach a bhfuil suim agat ann agus déanfaimid an fhaisnéis a sholáthraíonn tú a mheaitseáil le hairteagail inár mbunachar sonraí fairsing agus cóip PDF a sheoladh chugat láithreach.
Laghdaíonn gráinníní Ban-Lan-Gen colitis ainsealach athfhillteach spreagtha ag sulfáit sóidiam dextran i lucha trí mhicribhithe gut a mhodhnú agus táirgeadh SCFA Derived-GLP-1 intestinal a athbhunú.
Jiao Peng,1-3,*Li Xi,4,*Zheng Lin,3,5 Duan Lifang,1 Gao Zhengxian,2,5 Diehu,1 Li Jie,6 Li Xiaofeng,6 Shen Xiangchun,5 Xiao Haitao21Ollscoil Peking, Ospidéal Shenzhen, Roinn na Cógaisíochta, Shenzhen, Poblacht na Síne; 2Ionad Eolaíochtaí Sláinte Ollscoil Shenzhen, Scoil na Cógaisíochta, Shenzhen, Poblacht na Síne; 3Ionad Taighde Teicneolaíochta Innealtóireachta Ollscoil Leighis Guizhou um Fhorbairt agus Cur i bhFeidhm an Leighis Eitnigh agus an Leighis Thraidisiúnta Síneach, Aireacht Oideachais, Saotharlann Cógaisíochta Chúige Guizhou, Ollscoil Leighis Guizhou, Guiyang, Poblacht na Síne; 4 Roinn Gastraenterolaíochta, Ospidéal Shenzhen, Ollscoil Peking, Shenzhen, Poblacht na Síne; 5 Scoil na Cógaisíochta, Ollscoil Leighis Guizhou, Saotharlann Stáit um Fheidhm agus Cur i bhFeidhm Plandaí Íocshláinte, Guiyang; 6 Roinn na Leigheas Saotharlainne, Ospidéal Shenzhen Ollscoil Peking, Shenzhen, an tSín [email protected] Shen Xiangchun, Scoil na Cógaisíochta, Ollscoil Leighis Guizhou, Guizhou, Poblacht Phobal na Síne, 550004, Ríomhphost [email protected] Cuspóir: Is rogha cóireála nua í teiripe bunaithe ar GLP-1 le haghaidh galar athlastach bputóg. Is foirmliú frithvíreasach aitheanta de chuid na TCM iad gráinníní Ban-Lan-Gen (BLG) a léiríonn gníomhaíocht fhrith-athlastach fhéideartha i gcóireáil riochtaí athlastacha éagsúla. Mar sin féin, níl a éifeacht fhrith-athlastach ar choilitis agus a mheicníocht gníomhaíochta soiléir fós. MODHANNA: Chun colitis athiompaithe ainsealach spreagtha ag sulfáit sóidiam deasctran (DSS) a bhunú i lucha. Rinneadh innéacsanna gníomhaíochta galair, marcóirí histolaíochta díobhála, agus leibhéil cytokine pró-athlastacha chun measúnú a dhéanamh ar éifeacht chosanta BLG. Rinneadh tréithriú ar éifeachtaí BLG ar mhicribhithe an ghoile agus ar an ngoile trí leibhéil serum GLP-1 agus léiriú Gcg, GPR41, agus GRP43 sa choilíneacht, comhdhéanamh mhicribhithe an ghoile, leibhéil SCFAnna fecal, agus scaoileadh GLP-1 ó Táirgeadh GLP-1 díorthaithe ó SCFA i gcealla eipitéiliacha colonacha lucha príomhúla. Torthaí: Laghdaigh cóireáil BLG cailliúint meáchain coirp, DAI, giorrú colon, damáiste fíocháin colon, agus leibhéil cytokine pró-athlastacha TNF-α, IL-1β, agus IL-6 i bhfíochán colon go suntasach. Ina theannta sin, is féidir le cóireáil BLG léiriú Gcg colonach, GPR41 agus GRP43 agus leibhéil serum GLP-1 i lucha colitis a athbhunú go suntasach, agus trí bhaictéir a tháirgeann SCFA ar nós Akkermansia agus Prevotellaceae_UCG-001 a mhéadú, agus líonmhaireacht baictéar ar nós Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas agus Oscillibacter a laghdú. Ina theannta sin, is féidir le cóireáil BLG leibhéal na SCFAanna i feces lucha colitis a mhéadú go suntasach. Ag an am céanna, léirigh turgnaimh in vitro freisin gur féidir le sliocht fecal lucha ar tugadh BLG dóibh spreagadh mór a thabhairt do na cealla eipitéiliacha colonacha beaga príomhúla Murine a scaoileann GLP-1. Conclúidí: Tugann na torthaí seo le fios go bhfuil éifeacht frith-cholitis ag BLG. Tá an cumas ag BLG a fhorbairt mar theiripe, ar a laghad i bpáirt trí mhicribhithe an ghoile a mhodhnú agus táirgeadh GLP-1 díorthaithe ó SCFA intestinal a athbhunú. Drugaí geallta le haghaidh colitis athiompaithe ainsealach. Eochairfhocail: colitis, gráinníní Ban-Lan-Gen, micribhithe an ghoile, aigéid shailleacha gearrshlabhra, GLP-1
Is galar athlastach fadtéarmach an colon agus an rectum é colitis ulcerative (UC) arb iad is sainairíonna buinneach athfhillteach, pian bhoilg, meáchain caillteanas, agus stóil fhuilteacha múcopurulentacha.1 Le déanaí, tá méadú tagtha ar leitheadúlacht UC i dtíortha a raibh minicíocht íseal acu roimhe seo, lena n-áirítear an tSín, leis an tóir atá ag méadú ar stíleanna maireachtála an Iarthair.2 Cruthaíonn an méadú seo fadhbanna móra don tsláinte phoiblí agus tá impleachtaí tromchúiseacha aige maidir le cumas oibre agus cáilíocht beatha na n-othar. Is suntasach go bhfuil paitiniginéis UC fós doiléir den chuid is mó, ach glactar leis go ginearálta go gcuireann géineolaíocht, tosca comhshaoil, micribhithe an ghoile, agus an córas imdhíonachta le forbairt UC.3 Fiú amháin anois, níl aon leigheas ann do UC, agus is é cuspóir na cóireála go cliniciúil comharthaí cliniciúla a rialú, loghadh a spreagadh agus a chothabháil, cneasú múcasach a chur chun cinn, agus athfhillteach a laghdú. I measc na gcóireálacha clasaiceacha tá aimínsailiciléití, corticosteroidí, imdhíon-choscóirí, agus bithleighis. Mar sin féin, ní féidir leis na drugaí seo an éifeacht inmhianaithe a bhaint amach mar gheall ar a fo-iarsmaí éagsúla.4 Le déanaí, léirigh go leor staidéar cás go bhfuil acmhainneacht mhór léirithe ag leigheas traidisiúnta na Síne (TCM) chun cabhrú le... chun faoiseamh a thabhairt do UC le tocsaineacht íseal, rud a thugann le fios gur straitéis chóireála gealladh fúithi í forbairt teiripí nua TCM le haghaidh UC.5-7
Is ullmhúchán leighis traidisiúnta Síneach é Gráinníní Banlangen (BLG) a dhéantar as sliocht uisce fhréamh Banlangen.8 Chomh maith lena éifeachtúlacht fhrithmhíochaine, taispeánann BLG gníomhaíocht fhrith-athlastach fhéideartha i gcóireáil riochtaí athlastacha éagsúla.9,10 Ina theannta sin, tá glúcósinolítí (R,S-goitrin, progoitrin, epiprorubin agus glucoside leithlisithe agus aitheanta ó shleachta uiscí Radix isatidis) agus núicléasídí (hipocsantain, adenosine, úirídín agus guanosine) agus alcalóidigh indigo ar nós indigo agus indirubin.11,12 Tá sé doiciméadaithe go maith i staidéir roimhe seo go bhfuil éifeachtaí frith-cholitis láidre ag na comhdhúile adenosine, úirídín agus indirubin i samhlacha ainmhithe éagsúla de choilitis.13-17 Mar sin féin, níor rinneadh aon staidéir fhianaise-bhunaithe chun éifeachtúlacht BLG i gcoilitis a mheas. Sa staidéar seo, rinneamar imscrúdú ar an éifeacht chosanta a bhí ag BLG ar choilitis athiompaithe ainsealach spreagtha ag sulfáit sóidiam dextran (DSS) i lucha C57BL/6. agus fuarthas amach gur laghdaigh riarachán ó bhéal BLG athlasadh colon athiompaithe ainsealach de bharr DSS i lucha go suntasach, go bhfuil a mheicníochtaí rialála bainteach le modhnú microbiota gut agus athbhunú táirgthe peptide-1 cosúil le glúcagon-1 (GLP-1) díorthaithe ón gut.
Ceannaíodh gráinníní BLG (saor ó shiúcra, ceadaithe ag NMPA Z11020357; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Béising, an tSín; uimhir bhaisce: 20110966) ó chógaslanna. Ceannaíodh DSS (Meáchan Móilíneach: 36,000–50,000 Daltons) ó MP Biologicals (Santa Ana, SAM). Ceannaíodh sulfasalazine (SASP) (íonacht ≥ 98%), hematoxylin agus eosin ó Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAM). Ceannaíodh trealamh tástála Elisa lucha TNF-α, IL-1β agus IL-6 luminex ó chórais T&F (Minneapolis, MN, SAM). Ceannaíodh aigéad aicéiteach, aigéad propónach, agus aigéad bútarach ó Aladdin Industries (Shanghai, an tSín). Ceannaíodh aigéad 2-eitilebútarach ó Merck KGaA (Darmstadt, an Ghearmáin).
Ceannaíodh lucha fireann C57BL/6 6-8 seachtaine d'aois (meáchan coirp 18-22 g) ó Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Béising, an tSín) agus cuireadh i dtimpeallacht 22 ± 2 °C iad le timthriall solais/dorchadas 12 uair an chloig. Tugadh aiste bia caighdeánach creimirí do na lucha agus rochtain saor in aisce acu ar uisce óil ar feadh seachtaine amháin chun dul i dtaithí ar an timpeallacht nua. Roinneadh na lucha go randamach ina gceithre ghrúpa ansin: grúpa rialaithe, grúpa samhail DSS, grúpa cóireáilte le SASP (200 mg/kg, ó bhéal) agus grúpa cóireáilte le BLG (1 g/kg, ó bhéal). Mar a thaispeántar i bhFíor 1A, de réir ár staidéir roimhe seo, spreagadh colitis athfhillteach ainsealach turgnamhach i lucha le trí thimthriall de 1.8% DSS ar feadh 5 lá, agus uisce driogtha ina dhiaidh sin ar feadh 7 lá, de réir ár staidéir roimhe seo.18 Rinneadh lucha sna grúpaí cóireáilte le SASP agus BLG a chóireáil le SASP agus BLG, faoi seach, gach lá ag tosú ó lá 0. De réir turgnaimh réamhchéime, ba é an dáileog de Socraíodh BLG ag 1 g/kg. Idir an dá linn, socraíodh an dáileog de SASP ag 200 mg/Kg de réir na litríochta.4 Fuair ​​na grúpaí rialaithe agus samhail DSS an méid céanna uisce i rith an turgnaimh.
Fíor 1 Feabhsaíonn BLG colitis ainsealach athfhillteach de bharr DSS i lucha. (A) Dearadh turgnamhach ar choilitis ainsealach athfhillteach agus cóireáil, (B) athrú meáchain coirp, (C) scór innéacs gníomhaíochta galair (DAI), (D) fad an colon, (E) íomhá ionadaíoch den colon, (F) staining H&E an colon (formhéadú, ×100) agus (G) scór histeolaíoch. Cuirtear sonraí i láthair mar mheán ± SEM (n = 6). ##p < 0.01 nó ###p < 0.001 vs grúpa rialaithe (Con); *p < 0.05 nó **p < 0.01 nó ***p < 0.001 vs grúpa DSS.
Taifeadadh meáchan coirp, comhsheasmhacht stóil, agus fuiliú reicteach go laethúil. Cinneadh innéacs gníomhaíochta galair (DAI) trí scóir de mheáchan coirp, comhsheasmhacht stóil, agus fuiliú reicteach a chomhcheangal mar a thuairiscíodh roimhe seo.19 Ag deireadh an turgnaimh, rinneadh na lucha go léir a eotanáisiú agus bailíodh fuil, feces agus colon le haghaidh tuilleadh turgnaimh.
Socraíodh fíochán an cholúin le formailin agus leabaíodh é i bpairifín. Rinneadh codanna 5-micrón agus daiteadh iad le haemaitocsailín-eosin (H&E), ansin dalladh iad agus scóráladh iad mar a thuairiscíodh roimhe seo.19
Baineadh RNA iomlán fíochán an cholúin amach le himoibrí Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA), agus ina dhiaidh sin baineadh cDNA amach le trascríbhinn droim ar ais (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, an tSeapáin). Rinneadh PCR cainníochtúil ag baint úsáide as córas PCR fíor-ama le SYBR Green Master (Roche, Basel, an Eilvéis). Rinneadh trascríbhinní géine sprice a normalú go β-actin agus rinneadh anailís ar na sonraí ag baint úsáide as an modh 2-ΔΔCT. Taispeántar seichimh tosaitheoirí géine i dTábla 1.
Rinneadh aonrú agus cultúr cealla eipitéiliacha colóineacha lucha príomhúla mar a thuairiscíodh roimhe seo.20 Go hachomair, baineadh colóin lucha 6-8 seachtaine d'aois ar dtús tar éis iad a íobairt trí dhí-áitiú ceirbheacsach, ansin osclaíodh go fadaimseartha iad, rinneadh iad a chóireáil le Tuaslagán Salainn Chothrom Hanks (HBSS, gan cailciam agus maignéisiam) agus gearradh iad i bpíosaí beaga 0.5-1 mm. Ina dhiaidh sin, díleádh fíocháin le 0.4 mg/mL collagenase XI (Sigma, Poole, an Ríocht Aontaithe) i meán DMEM saor in aisce agus rinneadh lártheifneoiriú orthu ag 300 xg ar feadh 5 nóiméad ag teocht an tseomra. Athfhionraí an milléad i meán DMEM (le 10% séiream féatais bólachta, 100 Aonad/mL peinicillin, agus 100 µg/mL streiptimícin) ag 37 °C agus cuir trí mhogalra níolóin é (méid na bpoll ~250 µm). Cuireadh cuid de na cealla eipitéiliacha colóineacha i miasa bun gloine agus goradh iad le haigéad aicéiteach, aigéad propónach, aigéad bútarach, agus luch. sleachta fecal ar feadh 2 uair an chloig ag 37°C, 5% CO2.
Rinneadh fíochán an colon a homaiginiú le PBS, agus braitheadh ​​leibhéil na gcítocíní IL-6, TNF-α agus IL-1β i bhfíochán an colon ag baint úsáide as trealamh tástála ELISA luminex (T&F systems, Minneapolis, MN, SAM). Mar an gcéanna, cinneadh leibhéil GLP-1 i séiream agus i meán cultúir cealla eipitéiliacha colonacha lucha príomhúla le trealamh ELISA (Bioswamp, Wuhan, an tSín) de réir threoracha an mhonaróra.
Baineadh DNA iomlán as feces ag baint úsáide as trealamh eastósctha DNA (Tiangen, an tSín). Tomhaiseadh cáilíocht agus cainníocht an DNA ag cóimheasa 260 nm/280 nm agus 260 nm/230 nm, faoi seach. Ina dhiaidh sin, ag baint úsáide as gach DNA eastósctha mar theimpléad, úsáideadh tosaitheoirí sonracha 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) agus 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) chun réigiúin V3-V4 den ghéin rRNA 16S a aimpliú i réigiúin éagsúla. Glanadh táirgí PCR ag baint úsáide as an QIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN, an Ghearmáin), cainníochtú trí PCR fíor-ama, agus seicheamhú ag baint úsáide as an ardán seicheamhú IlluminaMiseq PE300 (Illumina Inc., CA, SAM). Chun anailís bithfhaisnéise a dhéanamh, rinneadh próiseáil sonraí de réir prótacail a tuairiscíodh roimhe seo.21,22 Go hachomair, bain úsáid as Cutadapt (V1.9.1) chun comhaid sainráite amha a scagadh. Rinneadh OTUanna a ghrúpáil ag baint úsáide as UPARSE (leagan 7.0.1001) le teorainn chosúlachta de 97%, agus úsáideadh UCHIME chun seichimh chiméireacha a bhaint. Rinneadh anailís agus aicmiú comhdhéanamh pobail ag baint úsáide as an aicmitheoir RDP (http://rdp.cme.msu.edu/) bunaithe ar bhunachar sonraí géine RNA ribeasómach SILVA.
Rinneadh leibhéil aigéid shailleacha gearrshlabhra (aigéad aicéiteach, aigéad propónach, agus aigéad bútarach) a thomhas mar a thuairiscigh Tao et al. roimhe seo, le roinnt modhnuithe.23 Go hachomair, cuireadh 100 mg de feces ar fionraí ar dtús i 0.4 mL d'uisce dí-ianaithe, agus ina dhiaidh sin cuireadh 0.1 mL d'aigéad sulfarach 50% agus 0.5 mL d'aigéad 2-eitilebútarach (caighdeán inmheánach), ansin rinneadh iad a homaiginiú agus a théamh ag 4°C. Lártheifneoirigh ag 12,000 rpm ar feadh 15 nóiméad ag C. Baineadh an forshnáithín le 0.5 mL d'éitear agus instealladh isteach sa GC é le haghaidh anailíse. Chun anailís a dhéanamh ar chrómatagrafaíocht gháis (GC), rinneadh anailís ar na samplaí ag baint úsáide as crómatagrafaíocht gháis GC-2010 Plus (Shimadzu, Inc.) a raibh brathadóir ianúcháin lasrach (FID) feistithe air. Baineadh amach an scaradh ag baint úsáide as colún ZKAT-624, 30 m × 0.53 mm × 0.3 μm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., an tSín). Fuarthas sonraí ag baint úsáide as bogearraí réitigh GC (Shimadzu, Inc.). Ba é 10:1 an cóimheas scoilte, ba nítrigin an gás iompróra, agus ba é 6 mL/nóim an ráta sreafa. Ba é 1 μL an toirt insteallta. Ba é 300°C teocht an insteallóra agus an bhraitóra. Coinníodh teocht an oighinn ag 140°C ar feadh 13.5 nóiméad, ansin méadaíodh go 250°C í ag ráta de 120°C/nóim; coinníodh an teocht ar feadh 5 nóiméad.
Cuirtear sonraí i láthair mar mheán ± earráid chaighdeánach an mheáin (SEM). Rinneadh measúnú ar shuntasacht na sonraí trí ANOVA aontreo agus ina dhiaidh sin tástáil il-raoin Duncan. Baineadh úsáid as bogearraí GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, SAM) do na ríomhanna uile agus measadh go raibh p < 0.05 suntasach go staitistiúil.
Is eol go maith gur galar ainsealach athfhillteach colitis é UC a bhfuil pian bhoilg, buinneach agus fuiliú dian mar thoradh air. Dá bhrí sin, bunaíodh colitis athfhillteach ainsealach spreagtha ag DSS i lucha chun éifeachtúlacht frith-cholitis BLG a mheas (Fíor 1A). I ​​gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, bhí meáchan coirp laghdaithe go suntasach agus DAI níos airde ag lucha sa ghrúpa samhail DSS, agus bhí na hathruithe seo aisiompaithe go suntasach tar éis 24 lá de chóireáil BLG (Fíor 1B agus C). Is sainairíonna tábhachtach de UC é giorrú an colon. Mar a thaispeántar i bhFíor 1D agus E, giorraíodh faid colon na lucha a fuair DSS go suntasach, ach faoiseamh a fuair siad le cóireáil BLG. Ina dhiaidh sin, rinneadh anailís histapaiteolaíoch chun athlasadh colon a mheas. Léirigh íomhánna daite H&E agus scóir phaiteolaíocha gur chuir riarachán DSS isteach go suntasach ar ailtireacht an colon agus gur eascair scrios cripte as, ach laghdaigh cóireáil BLG scrios cripte agus scóir phaiteolaíocha go suntasach (Fíor 1F agus G). Is suntasach go raibh éifeacht chosanta BLG ag dáileog de 1 g/Kg inchomparáide le SASP ag dáileog de 200 mg/Kg. Le chéile, tugann na torthaí seo le fios go bhfuil BLG éifeachtach chun déine an choilitis athiompaithe ainsealach de bharr DSS a laghdú i lucha.
Is marcóirí athlastacha tábhachtacha iad TNF-α, IL-1β agus IL-6 maidir le hathlasadh an choilíneach. Mar a thaispeántar i bhFíor 2A, spreag DSS méadú suntasach ar léiriú géine TNF-α, IL-1β agus IL-6 sa choilíneach i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe. Is féidir le riarachán BLG na hathruithe seo a d'eascair ó DSS a aisiompú go suntasach. Ansin, d'úsáideamar ELISA chun leibhéil na gcítocíní athlastacha TNF-α, IL-1β, agus IL-6 i bhfíochán an choilíneach a chinneadh. Léirigh na torthaí freisin go raibh leibhéil TNF-α, IL-1β, agus IL-6 sa choilíneacht méadaithe go suntasach i lucha a ndearnadh cóireáil orthu le DSS, ach gur mhaolaigh cóireáil BLG na méaduithe seo (Fíor 2B).
Fíor 2 Cuireann BLG cosc ​​ar léiriú géine agus ar tháirgeadh na gcítocíní pró-athlastacha TNF-α, IL-1β agus IL-6 i gcolainn lucha ar tugadh cóireáil DSS dóibh. (A) Léiriú géine colonach TNF-α, IL-1β agus IL-6; (B) leibhéil próitéine colonacha TNF-α, IL-1β agus IL-6. Cuirtear na sonraí i láthair mar mheán ± SEM (n = 4–6). #p < 0.05 nó ##p < 0.01 nó ###p < 0.001 vs grúpa rialaithe (Con); *p < 0.05 nó **p < 0.01 vs grúpa DSS.
Tá disbhióis intestinal ríthábhachtach i bpaitiginéis UC.24 Chun imscrúdú a dhéanamh ar cibé an modhnaíonn BLG micribhithe gut lucha ar tugadh DSS dóibh, rinneadh seicheamhú 16S rRNA chun anailís a dhéanamh ar phobal baictéarach ábhar an ghoile. Taispeánann an léaráid Venn go roinneann na trí ghrúpa 385 OTU. Ag an am céanna, bhí OTUanna uathúla ag gach grúpa (Fíor 3A). Ina theannta sin, léirigh innéacs Chao1 agus innéacs Shannon a thaispeántar i bhFíor 3B agus C go raibh éagsúlacht phobail mhicribhithe gut laghdaithe i lucha ar tugadh BLG dóibh, toisc gur laghdaigh innéacs Shannon go suntasach sa ghrúpa ar tugadh BLG dóibh. Baineadh úsáid as anailís chomhpháirteanna príomhúla (PCA) agus anailís chomhordanáidí príomhúla (PCoA) chun patrúin braislithe a chinneadh i measc na dtrí ghrúpa agus léirigh siad go raibh struchtúr pobail lucha ar tugadh DSS dóibh scartha go soiléir tar éis cóireála BLG (Fíor 3D agus E). Tugann na sonraí seo le fios go raibh tionchar suntasach ag cóireáil BLG ar struchtúr pobail lucha le colitis spreagtha ag DSS.
Fíor 3 Athraíonn BLG éagsúlacht mhicribhithe an ghoile i lucha le colitis spreagtha ag DSS. (A) Léaráid Venn de OTU, (B) Innéacs Chao1, (C) Innéacs saibhreas Shannon, (D) Plota scór Anailíse Comhpháirteanna Príomhúla (PCA) de OTU, (E) Fíor scór Anailíse Comhordanáidí Príomhúla OTU (PCoA). Cuirtear sonraí i láthair mar mheán ± SEM (n = 6). **p < 0.01 vs grúpa DSS.
Chun athruithe sonracha sa mhicribhithe fecal a mheas, rinneamar anailís ar chomhdhéanamh mhicribhithe an ghoile ag gach leibhéal tacsanomaíoch. Mar a thaispeántar i bhFíor 4A, ba iad na príomhfhíleama i ngach grúpa ná Firmicutes agus Bacteroidetes, agus Verrucomicrobia ina dhiaidh sin. Bhí méadú suntasach ar líonmhaireachtaí coibhneasta Firmicutes agus cóimheasa Firmicutes/Bacteroidetes i bpobail mhiocróbacha fecala lucha ar tugadh DSS dóibh i gcomparáid le lucha rialaithe, agus aisiompaíodh na hathruithe seo go suntasach tar éis cóireála BLG. Go háirithe, mhéadaigh cóireáil BLG líonmhaireacht choibhneasta Verrucobacterium i bhfeces lucha le colitis spreagtha ag DSS go suntasach. Ag leibhéal an teaghlaigh, bhí pobail mhiocróbacha fecala á n-áitiú ag Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae agus Prevotellaceae (Fíor 4B). I gcomparáid leis an ngrúpa DSS, mhéadaigh ídiú BLG líonmhaireacht Akkermansiaceae, ach laghdaigh sé líonmhaireacht Lachnospiraceae agus Ruminococcaceae. Go háirithe, ag leibhéal an ghéinis, Bhí an micribhithe fecal á áitiú ag Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia agus Prevotellaceae_UCG-001 (Fíor 4C). Léirigh an fhionnachtain seo freisin gur aisiompaigh cóireáil BLG an mhíchothromaíocht micribhithe go héifeachtach mar fhreagairt ar dhúshlán DSS, arb iad is sainairíonna laghdú ar Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas agus Oscillibacter, agus méadú ar Akkermansia agus Prevotellaceae_UCG-001.
Fíor 4 Athraíonn BLG líonmhaireacht mhicribhithe an ghoile i lucha a bhfuil colitis spreagtha ag DSS orthu. (A) Flúirse mhicribhithe an ghoile ag leibhéal an fhíleam; (B) Flúirse mhicribhithe an ghoile ag leibhéal an teaghlaigh; (C) Flúirse mhicribhithe an ghoile ag leibhéal an ghéinis. Cuirtear sonraí i láthair mar mheán ± SEM (n = 6). #p < 0.05 nó ###p < 0.001 vs grúpa rialaithe (Con); *p < 0.05 nó **p < 0.01 nó ***p < 0.001 vs grúpa DSS.
Ós rud é gurb iad aigéid shailleacha gearrshlabhra (SCFAanna) príomh-mheitibilítí Akkermansia agus Prevotellaceae_UCG-001, agus gurb iad aicéatáit, própróináit agus bútairít na SCFAanna is flúirseach i lumen na n-intestíní,25-27 táimid fós inár staidéar. Mar a thaispeántar i bhFíor 5, laghdaíodh tiúchan aicéatáit, própróináit agus bútairít fecal go suntasach sa ghrúpa a ndearnadh cóireáil DSS air, agus d’fhéadfadh cóireáil BLG an laghdú seo a chosc den chuid is mó.
Fíor 5. Méadaíonn BLG leibhéil SCFAanna i bhfeces lucha a bhfuil colitis spreagtha ag DSS orthu. (A) Ábhar aigéid aicéitigh i bhfeces; (B) ábhar aigéid phróipianaigh i bhfeces; (C) ábhar aigéid bútairígh i bhfeces. Cuirtear sonraí i láthair mar mheán ± SEM (n = 6). #p < 0.05 nó ##p < 0.01 vs grúpa rialaithe (Con); *p < 0.05 nó **p < 0.01 vs grúpa DSS.
Rinneamar ríomh breise ar chomhéifeacht comhghaolúcháin Pearson idir SCFA difreálach ar leibhéal an ghéinis agus micribhithe fecal. Mar a thaispeántar i bhFíor 6, bhí comhghaol dearfach ag Akkermansia le táirgeadh aigéid phróipóinigh (Pearson = 0.4866) agus aigéid bútairígh (Pearson = 0.6192). I gcodarsnacht leis sin, bhí baint dhiúltach ag Enteromonas agus Oscillobacter araon le táirgeadh aicéatáit, le comhéifeachtaí Pearson de 0.4709 agus 0.5104, faoi seach. Mar an gcéanna, bhí comhghaol diúltach ag Ruminococcaceae_UCG-014 le táirgeadh aigéid phróipóinigh (Pearson = 0.4508) agus aigéid bútairígh (Pearson = 0.5842), faoi seach.
Fíor 6 Anailís chomhghaolmhaireachta Pearson idir SCFAanna difreálacha agus miocróib choilíneacha. (A) Enteromonas le haigéad aicéiteach; (B) Bacillus creatháin inchinne le haigéad aicéiteach; (C) Akkermansia vs aigéad propónach; (D) Ruminococcus_UCG-014 le haigéad propónach; (E) Akkermansia le haigéad bútarach; (F) ) Ruminococcus _UCG-014 le haigéad bútarach.
Is táirge iar-aistriúcháin cineál-shonrach de phróghlúcagon (Gcg) é peiptíd cosúil le glúcagon-1 (GLP-1) a bhfuil airíonna frith-athlastacha aige.28 Mar a thaispeántar i bhFíor 7, spreag DSS laghdú suntasach ar léiriú mRNA Gcg. D’fhéadfadh cóireáil an colon agus BLG an laghdú Gcg spreagtha ag DSS a aisiompú go suntasach i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe (Fíor 7A). Ag an am céanna, laghdaíodh leibhéal GLP-1 sa serum go suntasach sa ghrúpa a ndearnadh cóireáil DSS air, agus d’fhéadfadh cóireáil BLG an laghdú seo a chosc den chuid is mó (Fíor 7B). Ós rud é gur féidir le haigéid shailleacha gearrshlabhra secretion GLP-1 a spreagadh trí ghníomhachtú gabhdóra cúpláilte próitéin-G 43 (GRP43) agus gabhdóra cúpláilte próitéin-G 41 (GRP41), rinneamar scrúdú freisin ar GPR41 agus GRP43 i colon lucha colitis agus fuarthas amach go raibh laghdú suntasach ar léiriú mRNA colon de GRP43 agus GPR41 tar éis dúshlán DSS, agus d’fhéadfadh cóireáil BLG na laghduithe seo a tharrtháil go héifeachtach (Fíor 7C agus D).
Fíor 7 Méadaíonn BLG leibhéil GLP-1 sa serum agus léiriú mRNA Gcg, GPR41 agus GRP43 sa cholún i lucha ar tugadh cóireáil DSS dóibh. (A) Léiriú mRNA Gcg i bhfíochán an cholúin; (B) Leibhéal GLP-1 sa serum; (C) Léiriú mRNA GPR41 i bhfíochán an cholúin; (D) Léiriú mRNA GPR43 i bhfíochán an cholúin. Cuirtear na sonraí i láthair mar mheán ± SEM (n = 5–6). #p < 0.05 nó ##p < 0.01 vs grúpa rialaithe (Con); *p < 0.05 vs grúpa DSS.
Ós rud é gur féidir le cóireáil BLG leibhéil GLP-1 serum, léiriú mRNA Gcg colonic, agus leibhéil SCFA fecal a mhéadú i lucha ar tugadh DSS dóibh, rinneamar scrúdú breise ar aicéatáit, propionate, agus bútairít chomh maith le lucha rialaithe (F-Con), colitis DSS (F-Con)-DSS) agus colitis cóireáilte le BLG (F-BLG) ar scaoileadh GLP-1 ó chealla eipitéiliacha colonic lucha príomhúla. Mar a thaispeántar i bhFíor 8A, spreag cealla eipitéiliacha colonic lucha príomhúla ar tugadh aigéad aicéiteach 2 mM dóibh, aigéad propónach, agus aigéad bútairíteach, faoi seach, scaoileadh GLP-1 go suntasach, rud a thagann le staidéir roimhe seo.29,30 Mar an gcéanna, spreag gach F-Con, F-DSS, agus F-BLG (comhionann le 0.25 g de feces) scaoileadh GLP-1 go mór ó chealla eipitéiliacha colonic lucha príomhúla. Is suntasach gurbh í an méid GLP-1 a scaoileadh ag cealla eipitéiliacha colonic lucha príomhúla ar tugadh F-DSS dóibh i bhfad níos ísle ná an méid a scaoileadh ag F-Con. agus cealla eipitéiliacha colóineacha lucha príomhúla arna gcóireáil le F-BLG. (Fíor 8B). Tugann na sonraí seo le fios gur athbhunaigh cóireáil BLG táirgeadh GLP-1 díorthaithe ó SCFA intestinal go suntasach.
Fíor 8 Spreagann SCFA díorthaithe ó BLG scaoileadh GLP-1 ó chealla eipitéiliacha colóineacha príomhúla lucha. (A) Spreag aigéad aicéiteach, aigéad propónach, agus aigéad bútarach scaoileadh GLP-1 ó chealla eipitéiliacha colóineacha príomhúla lucha; (B) spreag sleachta fecal F-Con, F-DSS agus F-BLG cealla eipitéiliacha colóineacha príomhúla lucha Méid GLP-1 scaoilte. Cuireadh cuid bheag de chealla eipitéiliacha colóineacha i miasa petri bun gloine agus rinneadh iad a chóireáil le 2 mM aigéad aicéiteach, aigéad propónach, aigéad bútarach, agus sleachta fecal F-Con, F-DSS, agus F-BLG (comhionann le 0.25 g d'fheacs), faoi seach. 2 uair an chloig ag 37°C, 5% CO2, faoi seach. Braitheadh ​​an méid GLP-1 a scaoileadh ó chealla eipitéiliacha colóineacha lucha príomhúla trí ELISA. Cuirtear na sonraí i láthair mar mheán ± SEM (n = 3). #p < 0.05 nó ##p < 0.01 vs. bán nó F-Con; *p < 0.05 vs. F-DSS.
Giorrúcháin: Ace, aigéad aicéiteach; Pro, aigéad propónach; áfach, aigéad bútarach; F-Con, sliocht fecal ó lucha rialaithe; F-DSS, sliocht fecal ó lucha colitis; F-BLG, ó colon cóireáilte le BLG Sleachta fecal lucha athlastacha.
Liostaithe ag an Eagraíocht Dhomhanda Sláinte mar ghalar teasfhulangach, tá ulcer colitis ag éirí ina chontúirt dhomhanda; Mar sin féin, tá modhanna éifeachtacha chun an galar a thuar, a chosc agus a chóireáil teoranta fós. Dá bhrí sin, tá géarghá le straitéisí teiripeacha nua sábháilte agus éifeachtacha a iniúchadh agus a fhorbairt le haghaidh UC. Is rogha ghealladh fúthu iad ullmhóidí leighis thraidisiúnta na Síne toisc go bhfuil sé léirithe go bhfuil go leor ullmhóidí leighis thraidisiúnta na Síne éifeachtach i gcóireáil UC i measc dhaonra na Síne thar na céadta bliain, agus is ábhair orgánacha bitheolaíocha agus nádúrtha iad go léir atá neamhdhíobhálach don chuid is mó do dhaoine agus d'ainmhithe.31,32 Bhí sé mar aidhm ag an staidéar seo ullmhúchán leighis thraidisiúnta na Síne sábháilte agus éifeachtach a lorg chun UC a chóireáil agus a mheicníocht gníomhaíochta a iniúchadh. Is foirmle luibhe Síneach aitheanta é BLG a úsáidtear chun an fliú a chóireáil.8,33 Léirigh obair inár saotharlann agus i saotharlanna eile go léiríonn indigo, táirge leighis thraidisiúnta na Síne próiseáilte ón amhábhar céanna le BLG, éifeachtúlacht shuntasach i gcóireáil UC i ndaoine agus in ainmhithe.4,34 Mar sin féin, níl na héifeachtaí frith-cholitis de BLG agus a éifeachtaí soiléir. Sa staidéar reatha, léiríonn ár dtorthaí go laghdaíonn BLG athlasadh colóineach spreagtha ag DSS go héifeachtach, a bhaineann le modhnú gut. micribhithe agus athchóiriú táirgeadh GLP-1 díorthaithe ón gut.
Is eol go maith go bhfuil tréimhsí athfhillteacha le gnéithe cliniciúla tipiciúla, amhail meáchain caillteanas, buinneach, fuiliú reicteach, agus damáiste fairsing don mhúcóis colon, tréithrithe ag UC.35 Dá bhrí sin, riaradh colitis athfhillteach ainsealach trí thrí thimthriall de 1.8% DSS a riaradh ar feadh cúig lá, agus seacht lá d'uisce óil ina dhiaidh sin. Mar a thaispeántar i bhFíor 1B, léirigh meáchain caillteanas luaineach agus scóir DAI ionduchtú rathúil colitis athfhillteach ainsealach. Léirigh lucha sa ghrúpa a ndearnadh cóireáil orthu le BLG téarnamh suas ó lá 8, a bhí difriúil go suntasach ó lá 24. Breathnaíodh na hathruithe céanna sa scór DAI freisin, rud a thugann le fios feabhas ar fheabhsú cliniciúil colitis. I dtéarmaí díobhála colon agus stádas athlastach, feabhsaíodh fad an colon, damáiste fíocháin an colon, agus léiriú géine agus táirgeadh na gcítocíní pró-athlastacha TNF-α, IL-1β, agus IL-6 i bhfíochán an colon go mór freisin tar éis cóireála BLG. Le chéile, léiríonn na torthaí seo go soiléir go bhfuil BLG éifeachtach i gcóireáil colitis athfhillteach ainsealach i lucha.
Conas a fheidhmíonn BLG a éifeachtaí cógaseolaíocha? Léirigh go leor staidéir roimhe seo go bhfuil ról lárnach ag micribhithe an ghoile i bpaitiniginéis UC, agus tá teiripí bunaithe ar mhicribhithe agus dírithe ar mhicribhithe tagtha chun cinn mar straitéis an-tarraingteach chun UC a chóireáil. Sa staidéar seo, léirigh muid gur eascair athruithe suntasacha i gcomhdhéanamh micribhithe an ghoile as cóireáil BLG, rud a thugann le fios go bhfuil baint ag éifeacht chosanta BLG i gcoinne colitis spreagtha ag DSS le modhnú micribhithe an ghoile. Tá an breathnóireacht seo ag teacht leis an tuairim gur cur chuige tábhachtach é athchlárú homeostasis an mhicribhithe gut chun éifeachtúlacht ullmhóidí TCM a thuiscint.36,37 Is suntasach gur baictéar Gram-dhiúltach agus anaeróbach go docht é Akkermansia a chónaíonn i gciseal múcas an ghoile, a dhíghrádaíonn múcáin, a tháirgeann aigéad propónach, a spreagann difreáil cealla gob, agus a chothaíonn feidhm sláine bacainn an mhúcóis.26 Tugann sonraí cliniciúla agus ainmhithe iomadúla le fios go bhfuil baint mhór ag Akkermansia le múcóis shláintiúil,38 agus riarachán ó bhéal Akkermansia spp. is féidir leis athlasadh múcasach a fheabhsú go suntasach.39 Tugann ár sonraí reatha le fios go méadaítear líonmhaireacht choibhneasta Akkermansia go suntasach tar éis cóireála le BLG. Ina theannta sin, is baictéar a tháirgeann SCFA é Prevotellaceae_UCG-001.27 Léirigh staidéir iomadúla go bhfuarthas líonmhaireacht choibhneasta íseal de Prevotellaceae_UCG-001 in eisceachtaí ainmhithe le colitis.40,41 Léiríonn ár sonraí reatha freisin gur féidir le cóireáil BLG líonmhaireacht choibhneasta Prevotellaceae_UCG-001 a mhéadú go suntasach i gcolún lucha ar tugadh cóireáil DSS dóibh. I gcodarsnacht leis sin, is baictéar mesophilic, anaeróbach go docht é Oscillibacter.42 tuairiscíodh go raibh líonmhaireacht choibhneasta Oscillibacter méadaithe go suntasach i lucha UC agus go raibh baint dhearfach shuntasach aige le leibhéil IL-6 agus IL-1β agus scóir phaiteolaíocha.43,44 Is suntasach gur laghdaigh cóireáil BLG líonmhaireacht choibhneasta Oscillibacter in eisceachtaí lucha ar tugadh cóireáil DSS dóibh go suntasach. Is suntasach gurbh iad na baictéir seo a athraíodh le BLG na baictéir ba mhó a tháirg SCFA. Léirigh go leor staidéar roimhe seo na héifeachtaí tairbhiúla féideartha a bhaineann le SCFAnna. ar athlasadh an choilíneach agus cosaint sláine eipitéiliach na stéige.45,46 Breathnaíodh inár sonraí reatha freisin go raibh méadú mór tagtha ar thiúchan aicéatáit, própróináit, agus bútairít SCFA in feces arna gcóireáil le DSS i lucha arna gcóireáil le BLG. Le chéile, léiríonn na torthaí seo go soiléir gur féidir le cóireáil BLG baictéir a tháirgeann SCFA arna spreagadh ag DSS a fheabhsú go héifeachtach i lucha le colitis athiompaithe ainsealach.
Is incretin é GLP-1 a tháirgtear den chuid is mó san ileum agus sa colon agus tá ról tábhachtach aige maidir le moill a chur ar fholmhú gastrach agus glúcós fola iar-phráinneach a ísliú.47 Tugann fianaise le fios gur féidir le dipeptidyl peptidase (DPP)-4, agonist gabhdóra GLP-1, agus nanaleigheas GLP-1 athlasadh intestinal a mhaolú go héifeachtach i lucha.48-51 Mar a tuairiscíodh i staidéir roimhe seo, bhí tiúchain arda SCFA bainteach le leibhéil plasma GLP-1 i ndaoine agus i lucha. 52 Léiríonn ár sonraí reatha gur mhéadaigh leibhéil serum GLP-1 agus léiriú mRNA Gcg go suntasach tar éis cóireála BLG. Mar an gcéanna, méadaíodh secretion GLP-1 go suntasach i gcultúir colonacha tar éis spreagadh le sleachta fecal ó lucha colitis arna gcóireáil le BLG i gcomparáid le spreagadh le sleachta fecal ó lucha colitis arna gcóireáil le DSS. Cén tionchar a bhíonn ag SCFAanna ar scaoileadh GLP-1?Gwen Tolhurst et al. Tuairiscíodh gur féidir le SCFA secretion GLP-1 a spreagadh trí GRP43 agus GPR41.29 Léiríonn ár sonraí reatha freisin go méadaíonn cóireáil BLG léiriú mRNA GRP43 agus GPR41 go suntasach i gcolainn lucha ar tugadh DSS dóibh. Tugann na sonraí seo le fios gur féidir le cóireáil BLG táirgeadh GLP-1 a spreagann SCFA a athbhunú trí GRP43 agus GPR41 a ghníomhachtú.
Is druga fadtéarmach thar an gcuntar (OTC) sa tSín é BLG. Is é 80g/Kg an dáileog uasta a fhulaingítear de BLG i lucha Kunming, agus níor breathnaíodh aon tocsaineacht ghéar.53 Faoi láthair, is é 9-15 g/lá (3 huaire sa lá) an dáileog molta de BLG (gan siúcra) i ndaoine. Léirigh ár staidéar gur fheabhsaigh BLG ag 1g/Kg colitis athiompaithe ainsealach spreagtha ag DSS i lucha. Tá an dáileog seo gar don dáileog BLG a úsáidtear go cliniciúil. Fuair ​​ár staidéar amach freisin go bhfuil a mheicníocht gníomhaíochta idirghabhálaithe, ar a laghad i bpáirt, ag athruithe sa mhicribhithe gut, go háirithe baictéir a tháirgeann SCFA, amhail Akkermansia agus Prevotellaceae_UCG-001, chun táirgeadh GLP-1 díorthaithe ón gut a athbhunú. Tugann na torthaí seo le fios gur fiú BLG a bhreithniú tuilleadh mar ghníomhaire teiripeach féideartha le haghaidh cóireáil chliniciúil ar an colitis. Mar sin féin, níl an mheicníocht chruinn trína modhnaíonn sé micribhithe an gut deimhnithe fós ag lucha easnamhach i micribhithe agus trasphlandú baictéarach fecal.
Ás, aigéad aicéiteach; ach, aigéad bútarach; BLG, pandan; DSS, sulfáit sóidiam deacstran; DAI, innéacs gníomhaíochta galair; DPP, peiptidile peiptidase; FID, brathadóir ianúcháin lasair; F-Con, rialú Sleachta fecala lucha; F-DSS, sleachta fecala lucha colitis DSS; F-BLG, sleachta fecala lucha colitis cóireáilte le BLG; GLP-1, peiptíd-1 cosúil le glúcagon; Gcg, glúcagon; crómatagrafaíocht gháis, crómatagrafaíocht gháis; GRP43, gabhdóir cúpláilte le próitéin G 43; GRP41, gabhdóir cúpláilte le próitéin G 41; H&E, hematoxylin-eosin; HBSS, Tuaslagán Salainn Cothrom Hanks; OTC, OTC; PCA, anailís phríomhchodanna; PCoA, anailís phríomhchomhordanáidí; Pro, aigéad propónach; SASP, sulfasalazine; SCFA, aigéid shailleacha gearrshlabhra; leigheas Síneach, leigheas traidisiúnta Síneach; UC, colitis othrasach.
D'fhormheas Coiste Eitice Ainmhithe Ionad Leighis Ollscoil Eolaíochta agus Teicneolaíochta Shenzhen-Hong Cong (Shenzhen, an tSín) na prótacail turgnamhacha uile de réir na dTreoirlínte Institiúideacha agus na Rialachán Ainmhithe (uimhir eitice A2020157).
Rinne na húdair uile ranníocaíochtaí suntasacha maidir le coincheap agus dearadh, éadáil sonraí, nó anailís agus léirmhíniú sonraí; ghlac siad páirt i ndréachtú an ailt nó i athbhreithniú criticiúil ar ábhar intleachtúil tábhachtach; chomhaontaigh siad an lámhscríbhinn a chur faoi bhráid an iris reatha; cheadaigh siad an leagan lena fhoilsiú sa deireadh; Freagrach as gach gné den obair.
Tacaíodh leis an obair seo ag Fondúireacht Náisiúnta Eolaíochta Nádúrtha na Síne (81560676 agus 81660479), tionscadal den chéad scoth Ollscoil Shenzhen (86000000210), Ciste Choiste Nuálaíochta Eolaíochta agus Teicneolaíochta Shenzhen (JCYJ20210324093810026), agus Ciste Taighde Eolaíochta agus Teicneolaíochta Leighis Chúige Guangdong (A2020157 agus A2020272), Cógaslann Ollscoil Leighis Guizhou Cúige Guizhou Maoinithe ag Key Laboratory (YWZJ2020-01) agus Ospidéal Ollscoil Peking Shenzhen (JCYJ2018009).
1. Tang B, Zhu J, Zhang B, et al.Acmhainneacht theiripeach triptóilíde mar ghníomhaire frith-athlastach i gcolaitis turgnamhach spreagtha ag sulfáit sóidiam deasctran i lucha. réamh-imdhíonachta.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Kaplan GG. Ualach domhanda IBD: ó 2015 go 2025. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2015;12:720–727.doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Peng J, Zheng TT, Li Xue, et al.Alcalóidigh díorthaithe ó phlandaí: modhnóirí galair geallta i ngalar athlastach bputóg.Prepharmacology.2019;10:351.doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B, et al. Cuireann Indigo Naturalis cosc ​​ar strus ocsaídiúcháin an choilíneach agus ar fhreagairtí Th1/Th17 i gcolaitis spreagtha ag DSS i lucha. Oxid Med Cell Longev. 2019;2019:9480945.doi: 10.1155/2019/9480945
5. Chen M, Ding Y, Tong Z. Éifeachtúlacht agus sábháilteacht leigheas luibhe Síneach Sophora flavescens (Sophora flavescens) i gcóireáil colitis othrasach: fianaise chliniciúil agus meicníochtaí féideartha. Prepharmacology.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Cao Fang, Liu Jie, Sha Benxing, Pan HF. Táirgí nádúrtha: drugaí atá éifeachtach go turgnamhach chun galar athlastach bputóg a chóireáil. Curr Pharmaceuticals. 2019;25:4893–4913.doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Zhang C, Jiang M, Lu A. Machnaimh ar chóireáil chúnta ar choilitis othrasach le leigheas traidisiúnta na Síne. Clinical Rev Allergy Immunization.2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Li Zhongteng, Li Li, Chen TT, et al.Éifeachtúlacht agus sábháilteacht gráinníní Banlangen i gcóireáil fliú séasúrach: prótacal staidéir le haghaidh triail rialaithe randamach.trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x